۲-۷ ژئوتوریسم ۱۳
۱۳
۱۳
۱۴
۲-۷- ۳-۱ فرسایش، خالق پدیدههای ژئوتوریسم ۱۴
۲-۷-۳-۲ قوانین و مقررات ژئو توریسم ۱۵
۲-۸ آمایش ۱۵
۲-۹ آمایش سرزمین ۱۵
۱۶
۲-۱۰ جغرافیای کاربردی و آمایش سرزمین ۱۶
۲- ۱۱ مدیریت محیط ۱۷
۲-۱۲ مشارکت ژئومورفولوژی درمدیریت محیط ۱۷
۲-۱۳ کاربرد ژئومورفولوژی در برنامه ریزی عمران حوضه های رودخانه ای ۱۸
۲-۱۴ خصوصیات حوضه های آبریز نواحی مرتفع ۱۸
۲-۱۵ خصوصیات حوضه های آبریز نواحی پست ۱۹
۲-۱۶ پیشینه تحقیق ۱۹
فصل سوم: روش اجرای تحقیق، مواد و روش
۳-۱داده ها ۲۹
۳-۲ روش کار ۳۲
۳-۲-۱ روش کرجینگ ۳۲
فصل چهارم: تجزیه و تحلیل داده ها و یافته های تحقیق
۴-۱ موقعیت ۳۴
۴-۲ توپوگرافی ۳۴
۴-۳ خاک ۳۷
۴-۴ پوشش گیاهی و کاربری اراضی ۳۹
۴-۵ زمین شناسی ۴۲
۴-۶ فیزیوگرافی ۴۶
۴-۶-۱ حوضه آبریز ۴۶
۴-۶-۲ خصوصیات ژئومتری حوضه ۴۶
۴-۶-۳ شیب حوضه ۴۸
۴-۶-۳-۱ نقش درجه شیب در فرسایش خاک ۴۸
۴-۷ هیدرولوژی ۵۰
۴-۷-۱ بررسی آبدهی فصلی حوضه امامزاده ابراهیم ۵۰
۴-۷-۲ تداوم جریان رودخانه ای ۵۱
۴-۷-۳ ارتفاع آب جاری شده ۵۱
۴-۷-۴ آب نمود یا هیدروگراف طبیعی حوضه امامزاده ابراهیم ۵۲
۴-۸-اقلیم ۵۳
۴-۸-۱ انتخاب پایه زمانی مشترک ۵۳
۴-۸-۲ تواتر طبیعی بارندگیهای سالانه ۵۳
۴-۸-۳ بارندگی ماهیانه ۵۶
۴-۸-۴ توزیع فصلی بارش و رژیم بارندگی ۵۸
۴-۸-۵ درجه حرارت ۵۹
۴-۸-۵-۱ رژیم حرارتی ۶۲
۴-۸-۵-۲ روند تغییرات میانگین ماهانه دما ۶۳
۴-۸-۵-۳ بررسی میانگین دمای ماهانه حداقل و حداکثر مطلق ۶۵
۴-۸-۵-۴ تغییرات روزانه و فصلی دما ۶۵
۴-۸-۵-۵ رژیم فصلی دما در حوضه ۶۵
۴-۸-۶ برف ۶۷
۴-۸-۷ تعداد روزهای یخبندان ۶۸
۴-۸-۸ رطوبت نسبی ۷۰
۴-۸-۹ تبخیر ۷۱
۴-۸-۱۰ ساعات آفتابی و مقدار ابرناکی ۷۳
۴-۸-۱۱ طبقه بندی اقلیمی ۷۵
۲. خدمت سریع انجام می شود.
۳. کارکنان همیشه مشتاق هستند به ارباب رجوع کمک کنند.
۴. هیچ گاه آنقدر مشغول نیستند که نتوانند به درخواست ارباب رجوع پاسخ دهند.
تضمین
۱. می توان به کارکنان اعتماد کرد.
۲. ارباب رجوع در تماس با کارکنان احساس آرامش می کند.
۳. کارکنان مؤدب و فروتن هستند.
۴. کارکنان دارای دانش لازم برای پاسخگویی به سوالات هستند.
همدلی
۱. به فرد فرد ارباب رجوع توجه می شود.
۲. ساعات کاری برای ارباب رجوع مناسب است.
۳. کارکنان به ارباب رجوع توجه خاصی دارند.
۴. واقعاً و قلباً به ارباب رجوع علاقمند هستند.
۵. کارکنان نیازهای خاص ارباب رجوع را درک می کنند.
در مدل مقیاس کیفیت خدمت از پاسخ دهندگان خواسته می شود ابتدا مولفه های فوق الذکر را به لحاظ انتظاراتشان از خدمات، بر اساس طیف لیکرت رتبه بندی کنند، سپس از همان پاسخ دهندگان خواسته می شود که ادراکات خود را از عملکردهای واقعی سازمان به لحاظ همان ویژگیها، رتبه بندی کنند.. در حقیقت در این مدل، کیفیت تابعی از شکاف بین انتظارات و عملکردها میباشد. بنابراین در این مدل به دنبال یافتن و برطرف کردن شکافهایی هستیم که منجر به نارضایتی مشتریان می شود (حسینی،۱۳۸۸،ص۴۰).
۲-۱-۷- هرم سازمانی واژگون
بزرگترین سرمایه سازمان ها مشتریان هستند. بنابراین، باید محور تمرکز هر سازمان بر مشتریان باشد و این امر لازمه اش این است که از دیدگاه خود آنان به انتظارات از خدمت بنگرند و در حد «کمی» فراتر از انتظارات آنان بدان پاسخ دهند. ارائه خدمت با کیفیت مستلزم تغییر شیوه تفکر سنتی و نگاهی نو به سازمان است. الگوی مبتنی بر سلسله مراتب یکسویه و رسمی، کسل کننده است و پویایی یا نوآوری را تشویق نمی کند(حسینی،۱۳۸۸،ص۳۴).
مشتریان و ارباب رجوع استفاده کنندگان نهایی از تلاشهای سازمان
کارکنان عملیاتی کارهای را انجام می دهند که مستقیماً بر رضایت مشتریان
مدیران میانی به کارکنان عملیاتی در انجام کار کمک می کنند مشکلات را
مدیران عالی
نمودار ۲-۳- هرم واژگون
ساختار سازمان ها باید از نظر بعد فکر به صورت هرم واژگون[۲۳] در آید. و این به معنای آن است که مشتریان مهمتر از مدیران هستند. ایفا کنندگان نقش اصلی در این ساختار، کسانی هستند که با مشتریان تماس دارند، یعنی کارکنانی که مستقیماً به مشتریان خدمت ارائه می دهند. می توانند به سازمان و طرز تلقی مشریان درباره آن شکل دهند. همه کارفرمایان، همه مدیران، همه سرپرستان و عموم کسانی که وظایف مختلف را انجام می دهند، به این منظور وجود دارند که در نهایت مشتری را خرسند سازند. هر مقصود دیگر غیر از این، موجب آشفتگی است. هرم سازمانی در این وضعیت باید امکان گفت و شنود را به وجود آورد. در این نوع موسسات، دغدغه کارکنان، خواست مشتریان است، نه آنچه مدیران می خواهند. وظیفه مدیریت این است که در تماس خود با کارکنان، از لحاظ شخصی، خود الگوی مناسبی برای رفتار و استاندارد خدمت باشند و کیفیت رفتار و توجه به مشتری را به این طریق شکل دهندو یعنی مدیران باید الگوی نقش در ارائه خدمت با کیفیت باشند(همان منبع،ص۳۵).
۲-۱-۸- مدل های مفهومی کیفیت خدمات
پیاده کردن برنامه «مدیریت کیفیت استراتژیک» نیازمند شناختی روشن از کیفیت خدمات (تعریف و بینش)، انتظارات مشتریان، کیفیت ادراک شده، مقیاسهای کیفیت و عوامل عمومی تعیین کننده کیفیت می باشد. برای شناخت این موارد نیاز به مدلهای مفهومی است که مدیریت را در شناخت کاستیها و برنامه ریزی برای پیاده سازی «بهبود کیفیت استراتژیک» یاری رساند. در این ارتباط هشت مدل مفهومی مطرح شده است که ما در ادامه به تشریح چهار مدل از میان این هشت مدل که مهمتر به نظر می رسند می پردازیم. این هشت مدل عبارتند از:
۲-۱-۹- مدل تحلیل شکاف های پنج گانه کیفیت خدمات
۲-۱-۹-۱- شکاف های کیفیت خدمات
در اواسط دهه ۱۹۸۰ پاراسورامان و زتنهال شروع به مطالعه شاخص های کیفیت خدمات و چگونگی ارزیابی کیفیت خدمات توسط مشتریان کردند، مدل آنها در رابطه با کیفیت خدمات بر اساس مصاحبه هایی با ۱۲ گروه از مشتریان هدف مختلف شروع شد. این مدل تلاش می کند تا فعالیت های عمده سازمان که ادراک از کیفیت را تحت تأثیر قرار می دهند نشان دهد. بعلاوه مدل تعاملات بین این فعالیت ها را نشان داده و اتصالات بین فعالیت های سازمان یا بازاریاب را که مربوط به ارائه سطح رضایت بخش از کیفیت خدمات است را معرفی می نماید. این اتصالات به عنوان شکاف ها یا عدم تطابق ها توصیف می شوند. در این مدل پنج شکاف مورد بررسی قرار می گیرد.
شکاف ۲
شکاف
شکاف
مصرف
ارائه کننده
ویژگی های
ادراکات مدیر از
شکاف ۱
تحویل خدمات
ارتباطات خارجی با
شکاف ۵
نیازهای
با توجه به پیوستگی ناشی از ورود حلقه، یو و مورل(۲۰۰۴) بیان کردند که این امر فقط تاثیر قابل توجه در جریان گلوله ای دارد که در آن یک حباب بزرگ تقریبا کل سطح مقطع لوله را اشغال می کند. در سناریوی جریان حبابی، این امر نادیده گرفته می شود. گزارشات مشابه در مدل هیبیکی و ایشی(۲۰۰۲)، چنگ و همکاران (۲۰۰۷) یافت می شود.
۵-۳) جزئیات عددی و تجربی
دو مدل عددی با تایید داده های تجربی هیبیکی و همکاران (۲۰۰۱) در محدوده سرعت های مایع ظاهری و سرعت های ظاهری گاز در محل و ۵۳٫۵ برآورد می شود(شکل ۵-۲ را ببینید). هشت شرایط جریان حبابی، در جدول ۵-۱ خلاصه شده است، برای تایید استفاده شده است. همانطور که در شکل ۵-۳ رسم شده است، چهار تا از شرایط در جریان حبابی هستند و چهار تای دیگر بیانگر مشخصات انتقال رژیم جریانی حبابی به گلوله ای است. مخصوصا در شرایط جریانی و ، مشاهده حباب های سرپوشی گزارش شده است. همانطور که در هو و یو (۲۰۰۵) بحث شده است، برخورد بین حباب ها – حباب ها ، حباب ها-گردابه ها در انتقال رژیم حبابی به گلوله ای ممکن است زمانی که شامل پیوستگی است، نسبتا پیچیده باشد که سبب ناسازگاری قابل توجه بین پیش بینی های عددی و اندازه گیری تجربی می شود.
شکل ۵-۳نقشه رژیم جریانی و انتقال شرایط جریانی مطالعه شده در کار حاضر(چنگ و همکاران ۲۰۰۷).
دو مجموعه معادلات جرم و مومنتوم هر فاز با معادلات موازنه جمعیتی اضافی ترکیب شده و مدل عدد چگالی متوسط حباب() در نظر گرفته میشود. در مدل ، مدل هسته های پیوستگی و شکستگی یو مورل(۲۰۰۴) اعمال شده است. برای کاهش هزینه محاسباتی، تقارن شعاعی فرض می شود، شبیه سازی های عددی حاصل فقط در ۶۰ درجه شعاعی لوله با شرایط مرزی متقارن در هر دو جانب عمودی به جای کل لوله انجام می شود. مش محاسباتی و هندسی در شکل ۵-۴ نشان داده شده است. در ورود بخش تست، چون قطر حباب های تزریقی نامعلوم است، توزیع یکنواخت سرعت های ظاهری مایع و گاز ، کسر خالی و اندازه حباب براساس شرایط جریانی توصیف شده مشخص می شود. جزئیات بیشتر شرایط مرزی در جدول ۵-۱خلاصه شده است. مدل آشفته انتقال تنش برشی() با مدل ویسکوزیته آشفته حباب القایی (ساتو و همکاران ۱۹۸۱) در مطالعه حاضر استفاده شده است.
جدول ۵-۱٫ سناریوهای جریان و جزئیات شرایط مرزی ورودی در شبیه سازی آزمایش هیبیکی و همکاران(۲۰۰۱)
(m/s) Superficial gas velocity | Superficial Liquid Velocity (m/s) |
|||
Hibiki et al.(2001) experiment | ||||
۰/۱۹۰ | ۰/۱۲۹ | ۰/۰۵۵۶ | ۰/۰۲۷۵ | ۰/۴۹۱ |
۰/۲۴۲ | ۰/۱۱۳ | ۰/۰۴۷۳ | ۰/۹۸۶ |
۳/۵۲**
۰/۰۰۳ns
میانگین مربعات
۱۶۰۶/۴**
۹۳/۳۲**
۳۱/۳۱**
۴۱۴۶۸۸/۹**
۱۰۵۵۱۴۳/۵**
۵۲/۷۴**
۱۹۶/۳**
۱/۱۷**
۰/۰۰۱ns
خطا
۲۴/۰۵
۷/۳۳
۰/۸۳
۲/۹۶
۶/۲۰
۲/۱۳
۳۱/۶
۰/۱۱۳
۰/۰۰۳
ضریب تغییرات
۲۰/۹۸
۵/۱۱
۲/۹۳
۴/۳۳۶
۲/۵۳۸
۳/۸
۷/۵
۰/۵۷
۰/۰۲۳
ns عدم معنیداری * و ** به ترتیب معنیداری در سطح ۵ درصد و ۱ درصد
شاخصهای اندازهگیری شده شامل ارتفاع بوته، طول ریشه، طول خوشه، عملکرد دانه، عملکرد کاه،، وزن هزار دانه، وقتی میزان پساب فاضلاب ۱۰۰ درصد است در بیشترین میزان خود است و هر چه میزان پساب فاضلاب کمتر میشود میزان این شاخصها کمتر میشود و این شاخصها وقتی پساب فاضلاب ۷۵ درصد است کمتر از ۱۰۰ درصد پساب فاضلاب و هنگامی که پساب فاضلاب ۵۰ درصد است میزان این شاخصها کمتر از ۵۰ درصد است و در نهایت هنگامی پساب فاضلاب در کمترین میزان خود یعنی صفر درصد است این شاخصها کمتر از ۷۵ درصد است و در نهایت هنگامی پساب فاضلاب در کمترین میزان خود یعنی صفر درصد است این شاخصها در کمترین میزان است. شاخص برداشت وقتی که پساب فاضلاب صد در صد و ۷۵ درصد است در بیشترین میزان است و با همدیگر اختلاف معنیداری ندارند و با سایر سطوح پساب فاضلاب اختلاف دارند وقتی پساب فاضلاب ۵۰ درصد است کمتر از این دو سطح پساب فاضلاب است و در نهایت شاخص برداشت هنگامی که پساب فاضلاب صفر است در کمترین میزان خود است. میزان پتاسیم برگ وقتی پساب فاضلاب صد در صد است دارای کمترین میزان خود است. وقتی پساب فاضلاب ۷۵ درصد است میزان پتاسیم بیشتر از زمانی است که پساب فاضلاب صد در صد است؛ و میزان پتاسیم برگ در هنگامی که پساب فاضلاب ۵۰ درصد و صفر درصد است در بیشترین میزان خود است و اختلاف معنیداری در این دو سطح پساب فاضلاب با همدیگر نداشتند.
منیزیم برگ در هیچ یک از سطوح مختلف پساب فاضلاب اختلاف معنیداری با همدیگر نداشتند.
۴-۱-۱- ارتفاع بوته (سانتیمتر):
نتایج تجزیه واریانس دادهها نشان داد اثرات سطوح مختلف پساب فاضلاب بر روی ارتفاع بوته در گیاه جو در سطح احتمال ۱ درصد معنیدار بود (جدول ۴-۱).
نتایج مقایسه میانگین دادهها نشان داد اثر سطوح مختلف آبیاری با پساب فاضلاب تصفیه شده شهری بر روی ارتفاع بوته اختلاف معنیداری داشته و بیشترین مقدار ارتفاع بوته در مصرف آبیاری با پساب فاضلاب ۱۰۰ درصد به میزان ۶۷/۱۱۵ سانتیمتر به دست آمد و کمترین مقدار ارتفاع بوته (عدم مصرف آبیاری با پساب فاضلاب یعنی آب معمولی) به میزان ۲/۶۴ سانتیمتر به دست آمد، همچنین ارتفاع بوته در آبیاری با پساب فاضلاب تصفیه شهری ۵۰ درصد و ۷۵ درصد به ترتیب ۷۳ و ۲/۹۵ سانتیمتر به دست آمد (نمودار ۴-۱)
نیز بیانگر وجود اختلاف معنیداری بین سطوح مختلف پساب فاضلاب بر عملکرد ارتفاع گیاه جو میباشد
تیمارهای آبیاری
F0 F50 F75 F100
۱۳۰ روزگی
چهارگانه ND+AI+EDS+Coryza،
آنفلوانزا،
دوگانه کشته Reo+ IBD
۲-۲-آزمایش ELISA [۱۰]
آزمایش الایزا روش ساده ای برای بررسی تعداد زیاد نمونه در مدت زمان کوتاه می باشد. اساس این آزمایش مشابه سایر آزمایش ها است، بدین معنی که سرم را از لحاظ حضور آنتی بادی اختصاصی بر علیه بیماریها بررسی میکند. در این روش عامل بیماریزای نشان دار شده با یک ماده رنگی با نمونه سرمی مخلوط می شود . زمانیکه آنتی بادی به عامل بیماریزا متصل میشود ماده رنگی تغییر رنگ می دهد، هر چقدر رنگ تولید شده تیره تر باشد نشان دهنده تیتر بالای آنتی بادی در سرم است .
نتایج این تست ها بصورت تیتر متوسط هندسی GMT[11] و درصد CV گزارش می شود که اگر درصد CV، حاصله کمتر از ۴۰ باشد، تیتر بدست آمده عالی و اگر بین ۶۰-۴۰ % باشد تیتر خوب و بیشتر از۶۰ % باشد تیتر حاصله ضعیف بوده و نیاز به بهبود دارد. در صورتیکه درصد CV کمتر از ۶۰% باشد، از معیار Mean برای تفسیر نمونه ها استفاده می کنیم. ولی اگر درصد CV بالای ۶۰ درصد باشد از معیار GMT برای تفسیر بهره می گیریم. در مورد اکثر بیماریهای طیور %CV پس از تجویز صحیح واکسنهای کشته بایستی کمتر از ۴۰% باشد و در مورد واکسنهای زنده، %CV بایستی کمتر از ۶۰% باشد. در مورد استفاده از واکسنهای زنده برای واکسیناسیون ابتدایی تغییر تیتر سرمی بسیار مهمتر از %CV می باشد.
GMT، معیاری است که تعداد پرنده ها با یک تیتر خاص و نیز تک تک پرنده ها را مدنظر می گیرد این کار باعث می شود که اثر گذاری پرنده هایی که تیتر خیلی پایین و یا خیلی بالایی دارد از بین برود و به نظر می رسد که این طرز گزارش صحیحتر از گزارش بصورت میانگین باشد.
روش کار آزمایش الایزا بدین صورت است که ۲-۳ ساعت قبل از کار باید کیت الایزای مربوطه را ازیخچال درآورده و در محیط اتاق قرار دهیم و بعد استفاده کنیم. در ابتدا سرم نمونه ها را که جدا کرده بودیم در یک پلیت ۹۶ خانه ته صاف جهت رقیق سازی ۱میلی لیتر از رقیق کننده را به پلیت اضافه می کنیم و سپس ۲ میکرولیتر از سرم مورد آزمایش را به پلیت رقت سازی اضافه می کنیم تا رقت ۱:۵۰۰ تهیه شود، لازم بذکر است که کنترلها رقیق سازی نمی شود. سپس ۱/۰ میلی لیتر از کنترل منفی را به گوده های A1 و A2 می افزائیم و ۱/۰ میلی لیتر از کنترل مثبت را نیز به گوده های A3 و A4 اضافه میکنیم. در مرحله بعدی ۱۰۰ میکرولیتر از سرم رقت سازی شده مورد آزمایش به پلیت اضافه می کنیم. سپس بمدت ۳۰ دقیقه در دمای اتاق انکوبه نموده و بعد از آن هر گوده را با ۳۵۰ میکرولیتر ۳ تا ۵ بار با آب دیونیزه شده شستشو میدهیم و سپس کاملاً آسپیره میکنیم. سپس ۱۰۰ میکرولیتر کونژوگه به هر یک از گوده ها اضافه می کنیم و ۳۰ دقیقه در دمای اتاق انکوبه نموده و مجدداً هر گوده را با ۳۵۰ میکرولیتر آب دیونیزه ۳ تا ۵ بار شستشو میدهیم. بعد از این مرحله ۱۰۰ میکرولیتر سوبسترای TMB به هر گوده اضافه میکنیم و ۱۵دقیقه در دمای اتاق انکوبه می کنیم و سپس ۱۰۰میکرولیتر محلول stop را به هر گوده اضافه میکنیم و بعداً گودهها را در دستگاه Reader الایزا گذاشته و در نهایت نتایج میزان جذب نوری در طول موجب nm 650 با بهره گرفتن از نرم افزار XChek قرائت نموده، و اطلاعات مربوطه را توسط دستگاه ثبت کرده و این اطلاعات که از ۳ گروه در مراحل مختلف خونگیری بود را ثبت و بایگانی نمودیم.
۲-۳-آزمایش HI[12]
بسیاری از ویروسهای انسانی و حیوانی قادر هستنند با چسبیدن به گیرندههایی که روی گلبولهای قرمز وجود دارند ، موجب آگلوتیناسیون آن ها شوند. این حالت اساس آزمایشات HI و HA را تشکیل میدهد.
بعضی از ویروسهای طیور مانند نیوکاسل، آنفلوانزا، برونشیت عفونی (بعد از قرار گرفتن در مقابل آنزیم)، گروه ۳ آدنوویروسها و همچنین مایکوپلاسماها قادر هستند گلبولهای قرمز را جمع نمایند.
آزمایش HI یک روش سرولوژیکی مطمئن و کم هزینه است که به وسیله آن میتوان سطح آنتیبادی را در خون به دنبال عفونت یا واکسیناسیون تعیین نمود. آزمایش HI را میتوان به دو روش آلفا و بتا انجام داد.
اما روش بتا به خاطر ارزیابی بهتر آنتیبادی بیشتر در آزمایشگاهها متداول میباشد. در این روش رقتهای سریال از سرم با مقدار ثابت آنتیژن مخلوط میشوند. مقدار آنتیژن لازم در آزمایش HI نسبت به نوع ویروس متفاوت میباشد. برای نیوکاسل۱۰-۸ واحد ، برونشیت عفونی و آنفلوانزا ۴ واحد و برای مایکوپلاسما ۴-۲ واحد HI تعیین شده
است.
۲-۳-۱- مراحل انجام آزمایش HI
جهت انجام آزمایش HI ، در ابتدا در تمامی گوده ها ،Lµ۲۵ سرم فیزیولوژی ریخته و سپس با بهره گرفتن از سرم مورد نظر که حاوی آنتی بادی می باشد رقت های متوالی را تهیه مینمائیم. سپس آنتیژن کالیبره شده را به میزان Lµ۲۵ به تمامی گودهها اضافه کرده و میکروپلیتها را به مدت ۳۰ دقیقه در تاریکخانه انکوبه میکنیم پس از آن میکروپلیتها را خارج کرده و Lµ۲۵ گلبول قرمز شسته شده را به تمامی گودهها اضافه مینمائیم و به مدت ۳۰ تا ۴۵ دقیقه دیگر نیز انکوبه نموده و نتایج را قرائت میکنیم.
مواد و لوازم لازم جهت آزمایش HI
الف- طرز تهیه گلوبول قرمز شسته شده
برای اطمینان بایستی از مخلوط خون حداقل سه قطعه جوجه استفاده گردد . اما ناچاراً در صورت استفاده از جوجههای مایهکوبی شده، خون اخذ شده باید دقیقاً شسته شود. خون را با سرنگ استریل از ورید بال یا قلب گرفته و در یک شیشه در دار به نسبت ۴ قسمت خون همراه با یک قسمت سیترات دو سود ۴% و یا با نسبت مساوی با محلول Alsever برای جلوگیری از انعقاد میریزیم و با ملایمت مخلوط مینمائیم.
مخلوط خون با ماده ضد انعقاد را با دور RPM1200 به مدت ۱۰ دقیقه سانتریفیوژ نموده و پلاسما را دور میریزیم. خون ته نشین شده را به نسبت ۱ به ۲۰ با سرم فیزیولوژی مخلوط و مجددا سانتریفیوژ مینمائیم.
عمل سانتریفیوژ کلاً سه بار تکرار میشود. خون ته نشین شده را به نسبت ۵/۰ تا ۱ درصد را در سرم فیزیولوژی مخلوط نموده و سوسپانسیون حاصل در آزمایشهای HA و HI مورد استفاده قرار میگیرد.
رسوب گلبول قرمز در لوله سانتریفیوژ را میتوان به نسبت ۱ سی سی گلبول قرمز در ۱۵ سی سی محلول Alsever خارج گردد. باید توجه داشت که خونگیری از مرغهای بالغ و سالم به عمل آید تا سیستم ایمنی آن ها تکامل یافته باشد و همچنین از مرغهای تبدار نباید استفاده شود.
ب- آنتی ژن
تهیه آنتی ژن بستگی به نوع عامل بیماری دارد. به عنوان مثال در مورد بیماری نیوکاسل، این عمل با تزریق ویروس به تخممرغ جنیندار و برداشت مایع آلانتوئیک حاصل میشود. معمولا سویه لاسوتا مورد استفاده قرار میگیرد. بهتر است ویروس با فرمالین۱/۰ درصد در حرارت ۳۷ درجه سانتی گراد به مدت ۱۶-۲۴ ساعت غیر فعال شود. ویروس غیر فعال شده را میتوان به مدت ۳-۲ ماه در یخچال ۴ درجه نگهداری نمود. میزان آنتیژن مورد نیاز برای آزمون HA نسبت به نوع عامل بیماری متفاوت میباشد.
ج- سرمهای منفی ، مثبت و سرمهای تحت آزمایش
سرمهایی که مورد آزمایش قرار میگیرند باید صاف و تمیز باشند. برای رسیدن به این هدف و نیز بدست آوردن سرم کافی موارد زیر توصیه می شود: